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摘要:
背景:靛玉红及其衍生物具有抗炎、抗肿瘤作用.可用于自身免疫性疾病的治疗,但其对正常免疫细胞的作用尚鲜见报道.目的:观察3'-甲异靛玉红对不同种系小鼠脾淋巴细胞增殖及生物功能影响的调节.设计、时间及地点:随机对照实验,于2007-07/2008-02在南方医科大学珠江医院血液科实验室完成.材料:清洁级BAL,B/c,C57BL/6以及F1代杂交鼠,均雄性,6~8周龄,体质量(20±2)g,由第一军医大学实验动物中心提供.3'-甲异靛玉红由美国Sigma公司提供.方法:取BALB/c,C57BL/6以及F1代杂交鼠脾组织研磨过滤为单个核细胞悬液,以5、10、15、20和25 μmol/L3'-甲异靛玉红处理各种系小鼠脾细胞,以未处理的为空白对照,以刀豆蛋白A处理组为阳性对照.主要观察指标:MTT法测定各种系小鼠脾淋巴细胞增殖情况:ELISA法测定淋巴细胞培养上清白细胞介素12活性;流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率及死亡率、细胞内活性氧浓度变化;RT-PCR检测细胞Bcl-2和CDK2基因mRNA水平;荧光显微检镜测细胞Bcl-2、Bax和CDK2蛋白表达率.结果:MTT检测显示,15、20和25 μmol/L3'-甲异靛玉红作用24h便可明显抑制3种小鼠脾淋巴细胞增殖(P<0.05),此效应呈量效、时效依赖性.将25 μ mol/L3'-甲异靛玉红处理72 h后的细胞离心后撤除3'-甲异靛玉红干预继续培养,椎虫蓝记数发现细胞恢复增殖.ELISA检测显示,各浓度3'-甲异靛玉红抑制各种系小鼠脾细胞分泌白细胞介素12,各种系间差异不显著.RT-PCR检测显示,15 μ mol/L3'-甲异靛玉红处理12 h后脾细胞Bcl-2和CDK2的mRNA水平明显降低.流式细胞仪检测细胞凋亡率及死亡率表明,15 μ mol/L,的3'-甲异靛玉红可降低各种系小鼠脾淋巴细胞凋亡相关蛋白Bcl-2水平,升高Bax蛋白水平,下调Bcl-2/Bax比例,降低CDK2表达.不同种系小鼠脾细胞均有部分凋亡现象,但死亡率无明显升高.各种系小鼠脾淋巴细胞阻遏于G2/M期,细胞内活性氧水平呈量效、时效依赖性升高,种系间差异不显著.结论:15-25μmolR3'-甲异靛玉红可逆性抑制不同种系小鼠脾细胞的增殖及分泌功能,此效应呈量效、时效依赖性,并启动细胞凋亡程序.
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文献信息
篇名 3'-甲异靛玉红对不同种系小鼠脾细胞增殖、凋亡及生物功能的调节
来源期刊 中国组织工程研究与临床康复 学科 医学
关键词 3'-甲异靛玉红 免疫功能 凋亡 白细胞介素12
年,卷(期) 2008,(34) 所属期刊栏目 技术与方法
研究方向 页码范围 6709-6713
页数 5页 分类号 R392.4
字数 5429字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.34.036
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 郭坤元 南方医科大学珠江医院血液科 138 688 13.0 16.0
2 张梅霞 南方医科大学珠江医院血液科 39 327 11.0 17.0
3 邓兰 南方医科大学珠江医院血液科 34 198 9.0 12.0
4 宋朝阳 南方医科大学珠江医院血液科 48 198 8.0 11.0
5 吴远彬 南方医科大学珠江医院血液科 9 20 3.0 4.0
6 胡海燕 南方医科大学珠江医院血液科 46 140 6.0 8.0
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3'-甲异靛玉红
免疫功能
凋亡
白细胞介素12
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中国组织工程研究
旬刊
2095-4344
21-1581/R
大16开
沈阳浑南新区10002信箱
8-584
1997
chi
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