3'-甲异靛玉红对不同种系小鼠脾细胞增殖、凋亡及生物功能的调节

• 作者: 吴远彬 宋朝阳 张梅霞 胡海燕 邓兰 郭坤元
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 3'-甲异靛玉红 免疫功能 凋亡 白细胞介素12
• 年，卷（期）: 2008,（34）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 6709-6713
• 页数: 5页
• 分类号: R392.4
• 字数: 5429字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.34.036

摘要

背景:靛玉红及其衍生物具有抗炎、抗肿瘤作用.可用于自身免疫性疾病的治疗,但其对正常免疫细胞的作用尚鲜见报道.目的:观察3'-甲异靛玉红对不同种系小鼠脾淋巴细胞增殖及生物功能影响的调节.设计、时间及地点:随机对照实验,于2007-07/2008-02在南方医科大学珠江医院血液科实验室完成.材料:清洁级BAL,B/c,C57BL/6以及F1代杂交鼠,均雄性,6～8周龄,体质量(20±2)g,由第一军医大学实验动物中心提供.3'-甲异靛玉红由美国Sigma公司提供.方法:取BALB/c,C57BL/6以及F1代杂交鼠脾组织研磨过滤为单个核细胞悬液,以5、10、15、20和25 μmol/L3'-甲异靛玉红处理各种系小鼠脾细胞,以未处理的为空白对照,以刀豆蛋白A处理组为阳性对照.主要观察指标:MTT法测定各种系小鼠脾淋巴细胞增殖情况:ELISA法测定淋巴细胞培养上清白细胞介素12活性;流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率及死亡率、细胞内活性氧浓度变化;RT-PCR检测细胞Bcl-2和CDK2基因mRNA水平;荧光显微检镜测细胞Bcl-2、Bax和CDK2蛋白表达率.结果:MTT检测显示,15、20和25 μmol/L3'-甲异靛玉红作用24h便可明显抑制3种小鼠脾淋巴细胞增殖(P＜0.05),此效应呈量效、时效依赖性.将25 μ mol/L3'-甲异靛玉红处理72 h后的细胞离心后撤除3'-甲异靛玉红干预继续培养,椎虫蓝记数发现细胞恢复增殖.ELISA检测显示,各浓度3'-甲异靛玉红抑制各种系小鼠脾细胞分泌白细胞介素12,各种系间差异不显著.RT-PCR检测显示,15 μ mol/L3'-甲异靛玉红处理12 h后脾细胞Bcl-2和CDK2的mRNA水平明显降低.流式细胞仪检测细胞凋亡率及死亡率表明,15 μ mol/L,的3'-甲异靛玉红可降低各种系小鼠脾淋巴细胞凋亡相关蛋白Bcl-2水平,升高Bax蛋白水平,下调Bcl-2/Bax比例,降低CDK2表达.不同种系小鼠脾细胞均有部分凋亡现象,但死亡率无明显升高.各种系小鼠脾淋巴细胞阻遏于G2/M期,细胞内活性氧水平呈量效、时效依赖性升高,种系间差异不显著.结论:15-25μmolR3'-甲异靛玉红可逆性抑制不同种系小鼠脾细胞的增殖及分泌功能,此效应呈量效、时效依赖性,并启动细胞凋亡程序.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭坤元	南方医科大学珠江医院血液科	138	688	13.0	16.0
2	张梅霞	南方医科大学珠江医院血液科	39	327	11.0	17.0
3	邓兰	南方医科大学珠江医院血液科	34	198	9.0	12.0
4	宋朝阳	南方医科大学珠江医院血液科	48	198	8.0	11.0
5	吴远彬	南方医科大学珠江医院血液科	9	20	3.0	4.0
6	胡海燕	南方医科大学珠江医院血液科	46	140	6.0	8.0