RNA干扰下调拓扑异构酶Ⅰ在小细胞肺癌细胞株的表达及其与拓扑替康敏感性的关系

• 作者: 刘秀菊 宋现让 张琼 柳永蕾 郭其森 郭琛
• 来源期刊: 中华肿瘤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: DNA拓扑异构酶Ⅰ基因 RNAi 小细胞肺癌细胞株H446 拓扑替康 药物敏感性
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 741-744
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 3806字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-3766.2008.10.006

摘要

目的 检测拓扑异构酶Ⅰ(TopI)在小细胞肺癌(SCLC)细胞株中的表达,并探讨其表达水平对拓扑替康(TPT)敏感性的影响.方法 采用Western blot检测TopⅠ在SCLC细胞株H446蛋白水平的表达;应用人工合成并荧光标记的小干扰RNA(siRNA),通过脂质体瞬时转染H446细胞.流式细胞仪检测转染效率;应用定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测各干扰序列对TopI在mRNA及蛋白水平的干扰效果,筛选最佳干扰序列;对转染后的细胞株进行药物敏感性实验,观察TopI的表达对TPT敏感性的影响.结果 TOPI基因在H446中有较高表达;siRNA干扰效果满意,转染效率可达86.7%左右;siRNA oligo TopI-892、siRNA oligo TopI-1152、siRNA oHgo TopI-2084和siRNA oligo TOpI-2397等4个干扰序列均抑制H446细胞%pI mRNA的表达,抑制率分别为(95.7 ±1.6)%、(90.8 ±1.6)%、(96.1±2.7)%和(96.3±1.8)%.序列siRNA oligo TopI-2084和siRNA oligo TopI-239r7干扰后,H446细胞TopI蛋白表达明显降低.药物敏感性实验结果显示,相同浓度的TPT对实验组H446细胞的抑制率明显低于转染前及阴性对照的H446细胞(P<0.01).结论 脂质体介导的人工合成siRNA瞬时转染可有效抑制H446细胞的TOPI表达,明显降低细胞对TPT的敏感性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭其森	山东省肿瘤防治研究院内一科	70	500	11.0	19.0
2	宋现让	山东省肿瘤防治研究院内一科	109	609	13.0	17.0
3	刘秀菊	山东省肿瘤防治研究院内一科	8	61	5.0	7.0
4	柳永蕾	山东省肿瘤防治研究院中心实验室	12	78	5.0	8.0
5	郭琛	山东省肿瘤防治研究院内一科	3	0	0.0	0.0
6	张琼	山东省肿瘤防治研究院内一科	7	40	3.0	6.0