乙型肝炎病毒全长基因的扩增及克隆

• 作者: 周陶友 唐红 孙辉 尹华 张媛媛 李红 陈杨
• 来源期刊: 胃肠病学和肝病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 全基因组DNA 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 779-781
• 页数: 3页
• 分类号: R373.2+1
• 字数: 2965字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5709.2008.10.001

摘要

目的 建立血清标本经聚合酶链反应(PCR)扩增乙型肝炎病毒(HBV)全长基因的新方法,并初步进行克隆分析,从而为HBV分子生物学及致病机理研究奠定基础.方法 针对位于整个HBV基因序列中的两个缺口区设计含酶切位点的引物,扩增3.2 kb HBV全长DNA,经酶切及连接后克隆人PUC18载体.结果 用PCR方法成功获得了3.2 kb HBV DNA,经Sal Ⅰ酶切克隆入PUC18载体,获得重组质粒PUC18/HBV3.2,酶切鉴定和PCR扩增证实重组质粒中含有3.2 kb HBV全长DNA,成功构建了HBV全基因克隆.结论 成功建立了从患者血清中克隆HBV全基因组的方法,为从全基因水平深入研究乙型肝炎病毒变异与致病机理的关系奠定了基础.