不同的固定及渗透方法对小鼠卵母细胞免疫荧光染色的影响

• 作者: 李瑞珍 谢颖颖 邵华 郑俊克 马恒东
• 来源期刊: 上海交通大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 固定 渗透 卵母细胞 免疫荧光染色 激光扫描共聚焦显微镜 小鼠
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 349-352
• 页数: 4页
• 分类号: Q503
• 字数: 3230字
• 语种: 中文

摘要

目的 探索有效的染色前固定及渗透卵母细胞的方法,以提高小鼠卵母细胞免疫荧光染色的效率.方法 采用4种不同的固定及渗透方法处理小鼠卵母细胞:①方案A:先用4%多聚甲醛(PFA)固定1 h,再用0,5%Triton X-100穿透10 min;②方案B:先用0.5% Triton X-100穿透10 min,再用4%PFA固定1 h;③方案C:用1%PFA+0.5%Triton X-100同时固定与穿透1 h;④方案D:用-20℃预冷甲醇固定15 min.分析10种核蛋白(TFⅡA、TFⅡB、TAF1、TAF4、polⅡ、BRF1、MeCP2、MBD2ab、HP1α及HP1β)在小鼠卵母细胞中的免疫荧光染色效果.结果 只有方案C能够完全检测出这10种蛋白质.结论 用1%PFA+0.5%Triton X-100同时固定与穿透1 h,可以在小鼠卵母细胞形态保持良好的同时检测出更多的蛋白质.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邵华	上海交通大学医学院新华医院泌尿外科组织工程研究室	67	545	13.0	20.0
2	马恒东	四川农业大学动物科技学院畜禽品种资源发掘与利用省重点实验室	49	294	9.0	13.0
3	谢颖颖	四川农业大学动物科技学院畜禽品种资源发掘与利用省重点实验室	1	8	1.0	1.0
4	郑俊克	上海交通大学医学院新华医院发育生物学研究中心	4	13	2.0	3.0
5	李瑞珍	上海交通大学医学院新华医院发育生物学研究中心	1	8	1.0	1.0