RNA干扰技术沉默Smad4基因表达对ECV304细胞增殖和迁移的影响

• 作者: 周剑峰 庄亮 曹阳 杨漾 马丁 马全富 黄晓园
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 肿瘤,实验性 RNA干扰 细胞增殖 基因表达 基因 Smad4 细胞,ECV304
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1019-1022
• 页数: 4页
• 分类号: R730.23
• 字数: 3077字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2008.12.001

摘要

目的:探讨利用RNA干扰技术下调Smad 4基因表达对人脐静脉内皮细胞增殖和迁移能力的影响,初步了解Smad 4在血管生成中的作用.方法:设计并合成靶向人Smad 4基因的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)片段siRNA1和siRNA2,脂质体介导转染入人脐静脉内皮细胞株ECV304.应用实时定量RT-PCR和Western印迹法检测转染前后Smad4基因表达水平;应用细胞周期分析和羧乙基锗倍半氧化物(6-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFSE)-流式细胞仪检测ECV304细胞转染前后细胞增殖能力的变化;通过单层细胞划痕实验观察细胞转染前后迁移能力的变化.结果:从2条siRNA中成功筛选出1条siRNA,干RNA和蛋白水平可明显下调Smad4基因的表达;ECV304细胞转染Smad4的siRNA后,细胞的增殖和迁移能力明显增强.结论:利用RNA干扰技术能够筛选出高效的特异阻断Smad 4基因表达的siRNA;Smad 4基因表达下调能够明显促进血管内皮细胞的增殖和迁移.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马丁	华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科	193	1145	16.0	23.0
2	庄亮	华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科	37	253	8.0	14.0
3	黄晓园	华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科	16	133	6.0	11.0
4	曹阳	华中科技大学同济医学院附属同济医院血液内科	74	273	9.0	14.0
5	马全富	华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科	6	21	2.0	4.0
6	杨漾	华中科技大学同济医学院附属同济医院血液内科	4	3	1.0	1.0