巢式甲基化特异性PCR检测不同类型组织标本中WIF-1基因启动子异常甲基化

• 作者: 丁文柏 夏道奎 张春芳 徐新娟 曾凡军 盛德乔 胡旭 陈世雄 韩钰 高宝安
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 巢式甲基化特异性PCR(nMSP) WIF-1 基因 甲基化
• 年，卷（期）: 2008,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1671-1673,1633
• 页数: 4页
• 分类号: R734.2|R394.2
• 语种: 中文

摘要

目的:采用一种高灵敏度的DNA甲基化分析方法,即巢式甲基化特异性PCR法(nested-MSP,nMSP),检测外科手术切除新鲜组织、石蜡包埋组织及纤维支气管镜活检组织中WIF-l基因启动子的异常甲基化状态.方法:将基因组DNA变性成为单链,用亚硫酸氢盐修饰单链DNA,所有未甲基化的胞嘧啶被转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不变.设计针时甲基化和非甲基化等位基因的特异引物,进行巢式PCR扩增,最后经凝胶电泳检测目的片段.结果:在3种类型的原发性非小细胞肺癌标本中都检测出了WIF-l基因启动子的异常甲基化.结论:巢式甲基化特异性PCR是一种灵敏度高、特异性强的甲基化检测方法,可广泛应用于不同类型标本基因启动子甲基化的分析.