人胎脑NT-4基因的体外构建

• 作者: 刘佳 张华堂 徐丹 朱兴宝 李劲涛 王廷华
• 来源期刊: 昆明医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人胎脑 神经营养因子-4 基因构建 体外
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 65-70
• 页数: 6页
• 分类号: R651
• 字数: 4139字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-4706.2008.04.017

摘要

目的 体外构建人神经生长因子-4(neumtrophin-4,NT-4)与质粒载体pEGFP-N1(卡那霉素抗性)的重组体,为后续的转基因移植治疗脊髓损伤创造条件.方法 用Trizol法提取人胎脑组织总RNA,经RT-PCR扩增,EorR I和BamH I核酸内切酶酶切电泳纯化获得人神经营养因子-4(NT-4)DNA.用含质粒载体pEGFP-N1DNA的大肠杆菌接种经划板,挑选菌落、振荡培养,并用碱裂解法提取质粒载体pEGFP-N1DNA,经酶切、电泳纯化后,通过连接、转化感受态细胞,DNA小量提取法获得NT-4目的基因与质粒载体pEGFP-N1 DNA的重组体,经DNA测序证实.结果 用上述方法成功获得NT-4-pEGFP-N1重组体.结论 此方法是一种体外构建人胎脑NT-4基因的成熟、稳定而有效的方法,可为后续的神经干细胞转染NT-4基因移植治疗神经系统损伤创造条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王廷华	昆明医学院神经科学研究所	307	1291	16.0	23.0
2	朱兴宝	成都军区昆明总医院神经外科	29	102	6.0	9.0
3	刘佳	昆明医学院神经科学研究所	32	206	7.0	13.0
4	李劲涛	昆明医学院神经科学研究所	13	21	3.0	4.0
5	徐丹	昆明医学院神经科学研究所	13	41	4.0	5.0
6	张华堂	中国科学院昆明动物研究所	3	3	1.0	1.0