产紫青霉β-葡萄糖醛酸苷酶基因的克隆与原核表达

• 作者: 宋占科 李春 王小艳 陈国强
• 来源期刊: 化工学报
• 关键词: 甘草酸 β-葡萄糖醛酸苷酶 克隆 产紫青霉
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 生物化学工程与技术
• 页码范围: 3101-3106
• 页数: 6页
• 分类号: Q78|TQ925
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0438-1157.2008.12.022

摘要

产紫青霉(Penicillium purpurogenum Li-3)β-葡萄糖醛酸苷酶可定向转化甘草酸生成单葡萄糖醛酸基甘草次酸.根据β-葡萄糖醛酸苷酶氨基酸序列的同源保守区设计简并引物,PCR扩增克隆得到β-葡萄糖醛酸苷酶编码基因pgus(GenBank登录号:EU095019),该基因全长1815bp,编码604个氨基酸,理论单亚基分子量为67.77×103,含有4个潜在的N-糖基化位点.构建原核表达载体pET-28a(+)-pgus,转化大肠杆菌BL21(DE3),获得高效表达pgus基因的重组菌.经IPTG诱导表达、Ni2+-NTA亲和层析柱纯化的重组酶PGUS-E,纯度达到95%以上,得率为25.6 mg·L-1,SDS-PAGE分析检测分子量约为70×103,比酶活达到6368 U·mg-1.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李春	北京理工大学生命科学与技术学院	58	619	14.0	20.0
5	陈国强	北京理工大学生命科学与技术学院	3	36	3.0	3.0
6	王小艳	石河子大学化学化工学院	4	39	3.0	4.0
7	宋占科	北京理工大学生命科学与技术学院	1	15	1.0	1.0