应用高分辨熔解曲线技术检测中国人Wilson病的常见基因突变

• 作者: 刘彦山 孙淼 孟岩 张学 杨威 赵秀丽 黄尚志
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Wilson病 ATP7B基因 高分辨熔解曲线分析 突变检测
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 515-519
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4256字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1003-9406.2008.05.006

摘要

目的 应用PCR-高分辨熔解曲线分析技术检测中国人Wilson病(Wilson disease,WD)患者中ATP7B基因内高频突变区第8和13外显子.方法 酚-氯仿法提取外周全血基因组DNA;PCR扩增患者ATP7B基因第8和13外显子及两个外显子中的突变热点区域,PCR产物经HR-1进行高分辨熔解曲线分析;进一步以限制性内切酶或(和)DNA测序法对高分辨熔解曲线检测结果进行验证.结果 在30例WD患者中,检测到R778L纯合子3例,R778L杂合子6例,P992L杂合子6例,P992D/S975Y的复合杂合子1例,R778L/P992L复合杂合子2例和R778L/752.33delG复合杂合子1例.本组样本中,R778L、P992L和S975Y的基因频率分别为25%、15%和1.67%.测序及限制性内切酶分析结果完全与高分辨熔解曲线分析结果一致.结论 高分辨熔解曲线分析检测ATP7B基因突变具有简便、快速、特异和灵敏等优点,可作为Wilson病患者及携带者突变筛查的优选方法.