Notch1蛋白在胚胎干细胞向神经细胞诱导分化过程中的表达

• 作者: 唐仕波 林少芬 王琪 肖迎 黄冰
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 胚胎干细胞 细胞分化 信号转导 Notch
• 年，卷（期）: 2008,（25）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 4967-4970
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 1308字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.25.027

摘要

背景:胚胎干细胞是体内各种成熟细胞的"种子"细胞,是神经移植和发育基因功能研究的有利工具.Notch1信号足多种神经细胞有序分化的关键性调控通路,目前对其在胚胎干细胞诱导分化过程中的动态表达尚无报道.目的:探讨胚胎干细胞向神经细胞定向诱导分化过程中,跨膜信号分子Notch1蛋向的表达.设计、时间及地点:细胞观察,于2003-10/2004-10在中山大学中山眼科中心完成.材料:中山大学实验动物中心自建BALB/C小鼠胚胎干细胞Ⅵ株,具备XY染色体,正常核型比例80%以上,由中山大学中山眼科中心黄冰教授惠赠.方法:胚胎干细胞复苏后,加入含20%胎牛血清、106 IU/L小鼠白血病抑制因子的高糖DMEM细胞培养基,置于37℃,5%CO2培养箱中,两三天常规消化传代.向传至11代的胚胎干细胞中加入含20%胎牛血清、5×10-7mol/L维甲酸的高糖DMEM诱导分化培养基,设立诱导1,5,9d 3个观察时间点.主要观察指标:倒置相差显微镜观察细胞形态变化.免疫荧光化学检测成熟神经元标志性抗原MAP-2的表达.免疫细胞化学、Western Blot法及流式细胞术检测Notch1蛋白的表达.结果:胚胎干细胞呈克隆样生长,至诱导第9天大部分克隆周围为单一密集的神经网络.随着诱导时间延长,胚胎干细胞分化出的MAP-2阳性神经细胞数逐渐增多.胚胎干细胞克隆内的细胞几乎均呈Notch1强阳性或刚性表达,诱导分化后Notch1蛋白的表达随时间延长而逐渐降低(P<0.01).结论:在胚胎干细胞向神经细胞的诱导分化过程中,Notch1信号逐渐关闭,提示Notch1可能对胚胎干细胞向神经细胞的特异性分化起重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐仕波	中山大学中山眼科中心	91	528	11.0	17.0
2	黄冰	中山大学中山眼科中心	43	246	9.0	13.0
3	王琪	山东大学附属省立医院眼科	26	35	3.0	3.0
4	肖迎	山东大学附属省立医院眼科	3	5	1.0	2.0
5	林少芬	中山大学中山眼科中心	33	140	7.0	10.0