人Flt3配体基因的克隆及其在CHO细胞中的表达

• 作者: 曹开源 梁蔚阳 蒋玉辉
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: Flt3配体 CHO细胞 基因克隆,表达
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 31-35
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3696字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2008.01.010

摘要

目的 克隆人Flt3配体(Flt3 LIg and,FL),并在CHO细胞中进行表达.方法 从健康人外周血中提取总RNA,通过RT-PCR技术,扩增Flt3配体胞外区cDNA功能性片段,经DNA测序证实后,将得到的片段基因插入pcDNA3.0表达载体,构建了pcDNA3.0-FL真核表达载体;将重组质粒pcDNA3.0-FL转染CHO细胞,经G418筛选出阳性细胞克隆,扩大培养,提取细胞总蛋白,用SDS-PAGE分离并Western blotting检测到在相对分子质量约24 000处有一显色条带.结果 FL胞外区cDNA被正确克隆到真核表达载体pcDNA3.0中并在CHO细胞中成功表达.结论 成功构建了真核表达载体pcDNA3.0-FL并在CHO细胞中成功表达,为FL的相关研究和应用开发奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹开源	中山大学中山医学院临床检验标准化研究中心	61	218	8.0	10.0
2	梁蔚阳		39	107	5.0	9.0
4	蒋玉辉		10	10	2.0	2.0