亚洲牛带绦虫磷脂酰肌醇转移蛋白α基因的克隆表达和免疫学分析

• 作者: 余新炳 包怀恩 吴璇 徐劲 胡凤玉 胡旭初 赵俊红 黄江
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 亚洲带绦虫 磷脂酰肌醇转移蛋白α 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1022-1024,1028
• 页数: 4页
• 分类号: R383.3
• 字数: 2460字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.11.008

摘要

目的 原核克隆表达亚洲牛带绦虫成虫磷脂酰肌醇转移蛋白α基因(Ta PITP α),探索其应用前景.方法 将亚洲牛带绦虫成虫PITP α克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠埃希菌BL-21/DE3中用IPTG诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定,用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹(Western Blotting)进行免疫学分析.结果 PCR、双酶切及DNA测序结果均表明pET-28a(+)-Ta PITP α重组质粒构建成功.SDS-PAGE结果表明目的基因在大肠埃希菌BL-21/DE3中获得高效表达,经亲和层析获得了高纯度蛋白.重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清和感染了亚洲牛带绦虫的猪血清识别,表明其具有免疫活性.结论 亚洲牛带绦虫成虫磷脂酰肌醇转移蛋白α基因可在大肠埃希菌BL-21/DE3中获得具有免疫活性的高效表达,为进一步的功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余新炳	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	201	1352	17.0	28.0
2	徐劲	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	104	568	13.0	17.0
3	胡旭初	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	108	574	13.0	17.0
4	黄江	贵阳医学院寄生虫学教研室	76	329	11.0	14.0
5	胡凤玉	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	6	31	4.0	5.0
6	赵俊红	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	6	26	3.0	5.0
7	吴璇	贵阳医学院寄生虫学教研室	7	13	2.0	3.0