犬瘟热病毒H基因原核表达载体的构建

• 作者: 华育平 王亚君
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 犬瘟热病毒 H基因 表达载体 构建
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1849-1851
• 页数: 3页
• 分类号: Q78|Q813
• 语种: 中文

摘要

利用本实验以前构建的含有犬瘟热病毒H基因的pMD18-T质粒,根据pMD18-T-H序列设计带有Xba1 Ⅰ和Hind Ⅲ酶切位点的引物,对H基因进行PCR扩增,得到约1800bp左右的片段.该片段被克隆到pMD18-Tsimple载体上,用Xba1 Ⅰ和Hind Ⅲ进行单、双酶切鉴定,筛选阳性克隆.将阳性克隆再用Xba1 Ⅰ和Hind Ⅲ进行双酶切,纯化回收CDVH基因片段.将原核表达载体pPROEXTMHTa、pet-30b用同样的方法酶切,回收载体片段.将CDV H基因片段分别用T4连接酶连接到回收的pPROEXTMHTa、pet-30b载体上,构建原核表达载体质粒pPROEXTMHTa-H和pet-30b-H.再用Xba1 Ⅰ和Hind Ⅲ进行单、双酶切鉴定阳性载体.本实验为下一步H蛋白表达、纯化并作为CDV诊断用抗原及CD的免疫预防奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王亚君	东北林业大学野生动物资源学院	22	54	4.0	6.0
2	华育平	东北林业大学野生动物资源学院	91	551	12.0	17.0