H9亚型禽流感病毒黏膜DNA疫苗与灭活油乳苗的联合免疫研究

• 作者: 刘蓓蓓 孙林 潘志明 焦新安 程宁宁 耿士忠 贾自文 黄金林
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 农学
• 关键词: H9亚型禽流感 减毒沙门氏菌 DNA疫苗 灭活油乳苗 联合免疫
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 425-429
• 页数: 5页
• 分类号: S855.3
• 字数: 4251字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.05.009

摘要

目的 构建减毒沙门氏菌介导的H9亚型禽流感病毒黏膜DNA疫苗,并探讨黏膜DNA疫苗与灭活油乳苗联合应用的免疫效力.方法 以RT-PCR法扩增H9N2亚型禽流感病毒分离株(A/Chicken/China/N/ 2005)的血凝素(HA)基因,然后克隆入pmcDNA3.1+载体中,获得重组质粒pmcDNA3.1-HA.通过电穿孔法将重组质粒转入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建沙门氏菌介导的黏膜DNA疫苗SL7207(pmcDNA3.1-HA).重组菌与灭活油乳苗联合免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,并设立重组菌SL7207(pmcDNA3.1-HA)单独免疫组、油苗免疫组、空载体免疫组及空白对照组.用HI或ELISA测定血清和小肠黏膜抗体效价,以H9N2亚型禽流感病毒攻击,计算免疫保护力.结果 联合免疫组和重组菌SL7207(pmcDNA3.1-HA)单独免疫组能激发机体产生黏膜免疫应答,且与其他试验组之间存在显著性差异(P<0.05).联合免疫组和重组菌SL7207(pmcDNA3.1-HA)单独免疫组的免疫保护力均与空载体组、空白对照组有显著差异(P<0.05),且联合免疫组的免疫保护率最高,达100%.结论 成功构建H9亚型禽流感病毒黏膜DNA疫苗,DNA疫苗与灭活油乳苗联合应用具有良好的免疫协同作用.