巨型艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建

• 作者: 卞庆松 姜连连 张建哲 董辉 赵其平 闫晓菲 韩红玉 黄兵
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 球虫 巨型艾美耳球虫 cDNA文库 SMART技术
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 195-198
• 页数: 4页
• 分类号: Q96
• 字数: 2714字
• 语种: 中文

摘要

为构建巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)孢子倾卵囊cDNA表灰文库,从E.maxima孢子化卵囊中提取总RNA,以总RNA为模板、λTriplex2TM为栽体,利用SMARTTM cDNA文库构建试剂盒构建全长cDNA表达文库.经测定构建的E.maxima cDNA表达文库的原始文库容量为1×106 pfu/ml,扩增后的文库滴度为5×1010pfu/ml,重组率为95%,插入片断主要集中在0.5～1kb之间.根据已知序列设计引物,能从文库中扩增出编码E.maxima免疫球蛋白重链结合蛋白的基因序列片段.结果 表明所构建的E.maxima cDNA表达文库质量良好,为克隆、筛选E.maxima的功能性基因奠定了基础.