弓形虫SAG1-MIC3融合基因真核表达载体的构建与鉴定

• 作者: 丛华 古钦民 周怀瑜 张加勤 李瑛 田小东 赵群力
• 来源期刊: 中国病原生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 刚地弓形虫 MIC3 SAG1 疫苗 构建 表达
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 190-193,214
• 页数: 5页
• 分类号: R382.5
• 字数: 3808字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5234.2008.03.010

摘要

目的 构建编码弓形虫RH株膜表面蛋白1(SAG1)和微线体蛋白3(MIC3)的重组真核表达载体pcDNA3.1-SAG1-MIC3并鉴定,为弓形虫疫苗研制作准备. 方法 采用PCR技术从弓形虫基因组DNA中分别扩增SAG1和MIC3基因片段,分别克隆入pMD18-T载体,并对重组入外源基因的质粒通过PCR、酶切和测序鉴定;采用亚克隆技术将SAG1和MIC3基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-),经含氨苄青霉素的LB平板筛选阳性重组质粒pcDNA3.1-SAG1-MIC3,PCR、酶切和测序鉴定;采用脂质体法将重组载体转染Hela细胞,经RT-PCR法检测转染细胞转录情况. 结果 MIC3和SAG1基因的TA-cloning经PCR和酶切鉴定,大小分别为933 bp和789 bp,与预期值一致;pcNDA3.1-SAG1-MIC3经酶切鉴定,目的片段约为1 722 bp,与SAG1-MIC3长度相当;测定重组载体的核苷酸序列,与GenBank中的相应序列100%同源;PCR验证载体携带的SAG1-MIC3融合基因在Hela细胞中转录生成mRNA. 结论 成功构建重组真核表达载体pcDNA3.1-SAG1-MIC3,为弓形虫核酸疫苗的研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	古钦民	山东大学医学院寄生虫学教研室	26	132	7.0	10.0
2	丛华	山东大学医学院寄生虫学教研室	29	149	7.0	11.0
3	李瑛	山东大学医学院寄生虫学教研室	38	138	7.0	10.0
4	周怀瑜	山东大学医学院寄生虫学教研室	31	134	7.0	10.0
5	赵群力	山东大学医学院寄生虫学教研室	30	127	6.0	10.0
6	张加勤	山东大学医学院寄生虫学教研室	7	60	3.0	7.0
7	田小东	山东大学医学院寄生虫学教研室	1	2	1.0	1.0