BMP7和EGFP重组腺病毒体外转染兔骨髓间充质干细胞的研究

• 作者: 刘永亮 叶钢 张英晨 方针强 易善红
• 来源期刊: 四川医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 骨形态发生蛋白7 增强型绿色荧光蛋白 基因转染
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 基金论文
• 页码范围: 129-131
• 页数: 3页
• 分类号: Q7
• 字数: 3596字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-0501.2008.02.002

摘要

目的 观测体外培养的兔骨髓间充质干细胞生物学特性,并转染重组腺病毒Ad5-EGFP-BMP7,观察BMP7与EGFP的表达情况.方法 通过密度梯度离心联合贴壁法,分离、纯化间充质干细胞;流式细胞仪检测细胞周期和表面标记;体外诱导间充质干细胞向成骨细胞、成脂肪细胞分化并鉴定.转染后,荧光显微镜及免疫细胞化学染色检测外源基因的表达.结果 原代及传代间充质干细胞为成纤维细胞样细胞;87%以上处于G0/G1期;CD44表达阳性,CD45表达阴性;经成骨细胞诱导后,碱性磷酸酶染色阳性,并有矿化结节形成;经成脂肪细胞诱导后,细胞内出现大量脂滴.转染Ad5-EGFP-BMP7后,荧光显微镜下可见EGFP表达阳性;免疫细胞化学染色显示细胞内BMF7表达阳性.结论 成功分离、纯化间充质干细胞,并鉴定其具有成体干细胞特性;重组腺病毒介导BMP7和EGFP体外成功转染间充质干细胞,并稳定表达BMP7、EGFP,为下一步实验奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张英晨	中国人民解放军第148医院泌尿外科	1	5	1.0	1.0