人羊膜上皮细胞分化为成骨细胞的特性

• 作者: 万卫红 刘祖林 刘金伟 宋秀军 方宁 章涛 陈代雄
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 羊膜上皮细胞 成骨细胞 诱导分化
• 年，卷（期）: 2008,（38）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 7518-7521
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 4744字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.38.033

摘要

背景:研究发现人羊膜上皮细胞系WISH和FC植入裸鼠体内均可分化成软骨和成骨,作者检索关于足月分娩人胎膜的羊膜上皮细胞是否具有成骨特性国内外报道少见.目的:以足月分娩胎膜的人羊膜上皮细胞为前体细胞,观察其在体外定向诱导条件下分化为成骨细胞的能力.设计、时间及地点:细胞分子水平检测,于2005-09/2006-12在贵州省细胞工程重点实验室完成.材料:经产妇知情同意,无菌采集健康足月剖宫产胎盘6份,实验经医院医学伦理委员会批准.方法:采用机械法剥离胎盘羊膜组织,用胰蛋白酶消化法分离人羊膜上皮细胞,按3×108 L-1密度接种进行原代培养.取第1代人羊膜上皮细胞,设立两组:诱导组以1×108 L-1密度接种于培养皿内,24 h后更换为含体积分数为0.1的胎牛血清、 100 nmol/L地塞米松、50 mg/L抗坏血酸、5 mmol/Lβ-甘油磷酸的诱导培养液.对照组换液成分为仅含体积分数为0.1的胎牛血清的LG-DMEM培养液.主要观察指标:原代细胞用流式细胞仪分析其表型,免疫细胞化学法检测细胞角蛋白19的表达.诱导后采用钙-钴法检测成骨细胞特异性碱性磷酸酶的表达,茜素红S检测钙盐沉积情况.结果:人羊膜上皮细胞表达间充质干细胞表面标志CD29、CD44和上皮细胞标志细胞角蛋白19.向成骨细胞诱导分化21 d后,人羊膜上皮细胞由圆形变成梭形、三角形,细胞胞浆内碱性磷酸酶呈阳性表达,且可见钙盐沉积.结论:源自足月分娩胎盘的人羊膜上皮细胞具有分化为成骨细胞的特性.