TAT-MafA融合蛋白诱导小肠细胞系IEC-6表达胰岛素

• 作者: 卢大儒 毋慧玲 沈坤堂 罗海兰 路君 金坚
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白质转导TAT MafA 小肠上皮细胞 胰岛素
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 140-144
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3976字
• 语种: 中文

摘要

借助蛋白质转导技术,利用胰岛β细胞转录因子MafA诱导小肠细胞系IEC-6表达胰岛素,为糖尿病的治疗提供新的方法.将TAT基因与MafA基因一起插入p32a(+)载体中,构建TAT-MafA融合蛋白原核表达载体,转化BL21获得表达菌株,经IPTG诱导和Ni柱亲和层析纯化TAT-MafA融合蛋白,用1μM浓度的该融合蛋白孵育IEC-6细胞12h和24h后,分别进行进胞检测和胰岛素表达检测.实验结果表明,细胞免疫荧光和Western-blot方法检测到经TAT-MafA融合蛋白作用12h后的IEC-6细胞中有该蛋白,并经细胞免疫荧光和KT-PCR的方法检测出TAT-MafA作用24h后的IEC-6细胞中有胰岛素的表达.因此,TAT-MafA融合蛋白可以高效进入小肠细胞系IEC-6细胞,并且进胞后仍保持MafA原有的生物学活性,能启动胰岛素基因的表达,诱导IEC-6成为胰岛素表达细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金坚	江南大学生物工程学院	196	1025	16.0	22.0
2	卢大儒	复旦大学遗传工程国家重点实验室	137	982	17.0	25.0
3	沈坤堂		40	140	6.0	9.0
4	路君	复旦大学遗传工程国家重点实验室	2	3	1.0	1.0
5	罗海兰	江南大学生物工程学院	1	3	1.0	1.0
6	毋慧玲	复旦大学遗传工程国家重点实验室	1	3	1.0	1.0