端粒酶逆转录酶基因修饰对人骨髓间质干细胞端粒酶活性的影响

• 作者: 何炜 李克 樊青霞 邢莹
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 间质干细胞 端粒酶 端粒酶逆转录酶 转染
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 68-71
• 页数: 4页
• 分类号: R329.2
• 字数: 2836字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2008.01.023

摘要

目的:观察外源性端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的异位表达对人骨髓间质干细胞(MSCs)端粒酶活性的影响.方法:无菌条件下,抽取健康志愿者骨髓2 mL,经离心、洗涤及传代培养后备用.取第5代人MSCs接种至6孔培养板中,待其融合达90%～95%时,用脂质体法对其进行转染,转染共分4组:正常对照组、脂质体组、pEGFP-C1质粒组、pEGFP-hTERT质粒组.选用G418进行抗性克隆的筛选.30 d后,正常对照组﹑脂质体组细胞全部死亡,而pEGFP-C1质粒组、pEGFP-hTERT质粒组则获得抗性克隆;将获得的抗性克隆进一步扩增后,选用pEGFP-C1质粒组、pEGFP-hTERT质粒组和未转染的人骨髓MSCs分别进行RT-PCR,检测转染前后hTERT mRNA的表达情况,并通过PCR-ELISA检测上述细胞的端粒酶活性.结果:未转染组和pEGFP-C1质粒组的人骨髓MSCs hTERT mRNA表达阴性,且端粒酶呈阴性;pEGFP-hTERT质粒组的人骨髓MSCs hTERT mRNA表达阳性,且端粒酶呈阳性.结论:外源性hTERT基因可以在人骨髓MSCs中获得异位表达,并能诱导人骨髓MSCs的端粒酶活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	樊青霞	郑州大学第一附属医院肿瘤科	283	1373	16.0	22.0
2	邢莹	郑州大学医学院干细胞研究中心	73	258	9.0	11.0
3	何炜	郑州大学第一附属医院肿瘤科	56	282	8.0	14.0
4	李克	郑州大学第一附属医院肿瘤科	29	102	6.0	9.0