人表皮干细胞的体外分离和培养

• 作者: 曾元临 辛国华 邱泽亮
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 表皮干细胞 体外 分离 培养
• 年，卷（期）: 2008,（43）
• 所属期刊栏目: 研究速报
• 页码范围: 8597-8600
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 1173字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.43.034

摘要

背景:如何获得高纯度的表皮干细胞以及维持其干细胞表型和体外增殖特性,是目前表皮干细胞体外培养过程中急需解决的问题.目的:建立人表皮干细胞体外分离和培养的技术方法.设计、时间及地点:细胞观察,于2005-03/2006-05在南昌大学第一附属医院?汉 烧伤科完成.材料:所用包皮来自2～12岁行包皮环切术的患者,患者无泌尿系统感染等疾病.方法:取包皮皮片,采用Dispase Ⅱ酶和胰蛋白酶两步法分离出角朊细胞和成纤维细胞,Ⅳ型胶原快速黏附法富集分离表皮干细胞.收集处于指数牛长期第二三代成纤维细胞的上清液,过滤后与角朊细胞无血清培养基等比例混合,并加入胎牛血清、表皮生长因子、牛垂体提取物等组成表皮干细胞培养液,用以人表皮十细胞的体外扩增培养,以角朊细胞作对照.主要观察指标:传至第2代,通过平板克隆形成实验计算克隆形成率和克隆维持时间,采用免疫组织化学染色检测β1整合素和角蛋白19的表达.结果:①与同一标本同一批次培养的角朊细胞相比,人表皮干细胞的克隆形成率明显升高,克隆维持时间延长(P＜0.01).②表皮干细胞β 1整合素及角蛋白19免疫组织化学染色均呈阻性.结论:应用Ⅳ型胶原快速黏附法及人成纤维细胞条件培养基,对人表皮干细胞成功进行了体外分离和培养.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾元临	南昌大学第一附属医院烧伤科	74	228	8.0	10.0
2	辛国华	南昌大学第一附属医院烧伤科	67	237	9.0	11.0