绿色荧光蛋白基因银耳表达载体构建及表达

• 作者: 孙淑静 游凯 胡方平 谢宝贵 郑域茹
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 银耳 绿色荧光蛋白基因 表达
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术科学
• 页码范围: 42-46
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3132字
• 语种: 中文

摘要

以银耳芽孢为材料,由载体pEGFP、pCAMBIA1300经过HindⅢ和EcoRI双酶切、连接、转化,重组质粒酶切验证,成功构建了由双孢蘑菇gpd启动子调控EGFP基因的银耳真核表达载体,命名pCB-BEGFP.采用电击转化法将携带EGFP基因的银耳表达载体pCB-BEGFP转化到银耳芽孢.提取4个转化子基因组DNA,用EGFP基因特异引物PCR扩增,电泳结果表明有与EGFP基因大小一致的特异带出现;荧光显微镜观察在再生培养基上的转化子可看到很强的绿光;其中一个转化子蛋白SDS-PAGE电泳,结果发现在大约27kD处有一明显的蛋白条带出现,与预期的蛋白分子量相近.以上结果证明EGFP基因转入银耳芽孢中,双孢蘑菇启动子可以调控外源基因的在银耳芽孢中正确表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢宝贵	福建农林大学菌物研究中心	186	1536	20.0	28.0
2	胡方平	福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室	78	2461	27.0	48.0
3	孙淑静	福建农林大学菌物研究中心	37	292	9.0	16.0
4	游凯	福建农林大学菌物研究中心	4	7	1.0	2.0
5	郑域茹	福建农林大学菌物研究中心	3	12	2.0	3.0