FISH-FCM方法检测酵母-细菌二元体系中微生物数量

• 作者: 张燕燕 郑少奎 陈进军
• 来源期刊: 生态学报
• 关键词: 荧光原位杂交 流式细胞术 微生物计数 酵母 细菌 超声
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 页码范围: 4849-4855
• 页数: 7页
• 分类号: Q143|Q145|Q93-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-0933.2008.10.028

摘要

以废水生物处理系统和生物发酵系统出现的酵母细菌二元体系作为研究对象,探讨了二元体系生物样品的最佳超声分散条件以及同时检测酵母和细菌数量时荧光原位杂交(FISH) 流式细胞术(FCM)技术的测量精度.染色 FCM检测表明:同时适用于混合酵母样品(酵母假菌丝)和混合细菌样品(活性污泥絮体)的最佳超声分散条件为100 W 、60～90 s,但过强超声条件(120 s)对酵母Candida tropicalis纯培养物(或细菌Escherichia coli纯培养物)的超声粉碎效果完全不同于混合酵母样品(或混合细菌样品).在此基础上,以C. tropicalis和E. coli分别作为酵母和细菌的模式微生物,采用双探针杂交的FISH FCM技术检测了背景微生物(C. tropicalis或E. coli)浓度为107个/ml时二元体系中目标微生物(102～107个/ml)的数量.流式细胞仪能够明显区分噪音和二元体系中的酵母和细菌,因而一次进样时能够同时分析两种微生物数量,并且目标微生物浓度可以精确到104个/ml,此时微生物含量仅为0.1%,其中细菌浓度甚至可以精确到103个/ml(相应含量仅为0.01%).然而,当二元体系中目标微生物浓度过低时(<104 个酵母/ml或<104 个细菌/ml),背景微生物的存在会严重影响FISH FCM技术的测量准确性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑少奎	北京师范大学环境学院水环境模拟国家重点实验室	18	223	9.0	14.0
2	张燕燕	北京师范大学环境学院水环境模拟国家重点实验室	8	105	6.0	8.0
3	陈进军	北京师范大学环境学院水环境模拟国家重点实验室	2	61	2.0	2.0