犬瘟热病毒Yunnan株H基因的克隆与表达

• 作者: 任玉莹 余方芳 宋贵强 廖金 张富强 张泉鹏 张连江 李作生 王灵强 聂福平 范泉水 邱薇 龙贵伟
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 犬瘟热病毒 H基因 克隆与表达 免疫印迹
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 9-12
• 页数: 4页
• 分类号: S852.655|S858.292
• 字数: 1930字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2008.01.003

摘要

根据已发表的犬瘟热病毒(CDV)Onderstepoort株的序列设计两对引物,以犬瘟热病毒云南株感染的Vero细胞收获病毒提取的总RNA为模板,RT-PCR扩增出H基因的939 bp(H基因前段,H1)和920 bp(H基因后段,H2)片段,分别将其定向克隆于PET-28a(+)中,将重组质粒转化宿主菌BL21(DE3)plysS,在35℃、1.0 mmol/L IPTG诱导下获得良好表达,经SDS-PAGE鉴定,表达的融合蛋白为34 ku,与预期大小一致.免疫印迹试验显示,该重组蛋白可被CDV Onderstepoort株多克隆抗体识别,表明该重组蛋白具有抗原性.