大鼠肝卵圆细胞的分离、鉴定及体内移植

• 作者: 宋继昌 张金卷 朱争艳 李涛 杜智 王毅军 聂福华 高英堂
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 干细胞 大鼠,Wistar 卵母细胞 细胞分离 细胞移植 肝功能衰竭,急性
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 122-125
• 页数: 4页
• 分类号: R6
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2008.02.014

摘要

目的:探讨大鼠肝卵圆细胞分离、纯化方法,并对暴发性肝功能衰竭大鼠模型进行体内移植.方法:以雄性Wistar大鼠肝卵圆细胞增殖模型为供体,Seglen胶原酶原位灌注结合Percoll密度梯度离心分离纯化大鼠卵圆细胞,并进行鉴定.D-氨基半乳糖(1 200mg/kg)诱导雌性大鼠暴发性肝功能衰竭模型,肝脏注射移植细胞0.4mL,移植前及移植后取血测定血清谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBiL),PCR方法测定受体肝脏组织性别决定因子.结果:平均细胞产量为(5.10±0.40)×106,细胞活性率(94.30±1.89)%.光镜、电镜及免疫组化染色符合卵圆细胞特点,体外培养可形成克隆样结构.移植组暴发性肝功能衰竭大鼠中位生存时间延长(P<0.05),血清ALT、TBiL.水平下降,各时间点组间比较均低于对照组(P<0.01).肝脏病理损伤减轻,受体肝脏组织中性别决定因子呈阳性表达,且随时间延长而表达增强.结论:本方法可成功诱导、分离、纯化大鼠肝卵圆细胞.体内移植延长暴发性肝功能衰竭大鼠中位生存时间,改善肝功能及病理指标.