用EBV转化的肝癌患者B细胞构建噬菌体单链抗体库

• 作者: 张志杰 李官成 李跃辉 童永清 肖艳
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: EB病毒转化 噬菌体抗体库 肝癌 单链抗体
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1040-1044
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 字数: 3992字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2008.08.012

摘要

目的 构建抗肝癌人源噬菌体单链抗体库.方法 体外致敏并用EBV转化肝癌患者的PBMC.用PCR分别扩增VH和VL基因并组成ScFv基因.将ScFv基因与载体连接后,转化大肠杆菌MC1061,构建噬菌体呈现型ScFv库.结果 经EBV转化的4例肝癌患者PBMC,ELISA检测均有抗肝癌抗体产生,经多次PCK,扩增出6种vH(γ、μ)和9种VL(κ、λ)基因,经连接组成54种ScFv基因.将ScFv基因与载体连接后.导入大肠杆菌MC1 061.经四环素抗性筛选,得到库容为1.0×108的初级噬菌体抗独特型抗体库,噬菌体DNA中全长ScFv基因的插入率为80%.结论 用体外致敏法结合噬菌体抗体库技术,制备全人源抗肿瘤单链抗体(ScFv),这一策略是完全可行的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李官成	中南大学肿瘤研究所免疫室	65	245	9.0	11.0
2	童永清	中南大学肿瘤研究所免疫室	11	34	4.0	5.0
3	李跃辉	中南大学肿瘤研究所免疫室	35	119	7.0	9.0
4	肖艳	中南大学肿瘤研究所免疫室	5	16	2.0	4.0
5	张志杰	中南大学肿瘤研究所免疫室	9	36	3.0	5.0