AFP基因特异性miRNA表达质粒的构建及鉴定

• 作者: 张玉玲 栾英姿 汪运山 苏占涛 郏雁飞 郑燕
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 质粒 甲胎蛋白 基因 表达
• 年，卷（期）: 2008,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 33-35
• 页数: 3页
• 分类号: Q782|R318
• 字数: 1855字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2008.11.013

摘要

目的 构建针对人甲胎蛋白(AFP)基因的miRNA表达质粒,为进一步研究AFP基因功能奠定基础.方法 沿mRNA序列寻找连续两个AA及后面的19个核苷酸,通过同源性比较,选择与其他任何基因无同源性的序列即作为潜在的miRNA靶位点,针对AFP基因的编码序列体外合成两段互补的寡核苷酸,与线性化的pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR RNAi EXPRESSION VECTOR载体连接后转化大肠杆菌,扩增、纯化获得所需质粒,以琼脂糖凝胶电泳、PCR及基因测序鉴定其相对分子质量及插入片段的序列.结果 纯化质粒的相对分子质量为5.8 kb,PCR鉴定结果符合目的 条带(260 bp左右)大小,插人的寡核苷酸序列与设计的序列完全相符.结论 成功构建了针对人AFP基因的miRRA表达质粒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪运山		65	281	10.0	13.0
2	郏雁飞		2	0	0.0	0.0
3	苏占涛	山东省医学科学院基础医学研究所	4	6	1.0	2.0
5	张玉玲	山东省医学科学院基础医学研究所	1	0	0.0	0.0
9	栾英姿		1	0	0.0	0.0
12	郑燕		1	0	0.0	0.0