在体诱导表皮细胞去分化的初步实验研究

• 作者: 付小兵 孙同柱 李海红 王君 蔡飒 郭永峰 雷永红 韩冰
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 去分化 异种移植 表皮细胞 表皮干细胞 胞外信号调节激酶
• 年，卷（期）: 2008,（21）
• 所属期刊栏目: 专题报道:国家973计划--严重创伤救治与损伤组织修复的基础研究
• 页码范围: 1998-2002
• 页数: 5页
• 分类号: R-332|R322.991|R329.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2008.21.008

摘要

目的 在体诱导表皮细胞去分化,探索与表皮细胞去分化有关的信号通路.方法 包皮皮片去除皮下组织,用中性蛋白酶分离表皮,Ⅳ型胶原反复粘贴并牵拉表皮去除基底细胞层.处理后表皮片移植于裸鼠全层皮肤下,分别于3、5、7 d取出移植皮片,采用免疫组织化学染色、流式细胞仪检测、Western blot和RT-PCR等方法检测皮片移植前后表型的改变和ERK MAPK通路各信号分子表达的变化情况.结果 去基底细胞层处理的表皮片干细胞标志物CK19和β1整合素染色阴性;移植后5 d,存活皮片CK19和β1整合素染色呈多层分布,而不是正常表皮中的单层分布.流式细胞仪检测结果显示,表皮片移植后CK19阳性细胞和β1整合素阳性细胞由移植前的0.00%分别增加到7.54%和5.24%,而CK10阳性细胞由99.62%下降为86.56%.Western blot和PCR检测也证实CK19和β1整合素蛋白水平和mRNA水平表达在移植后明显增强.ERK及上下游信号分子(p-Raf、p-MEK1/2、p-ERK1/2和c-myc)表达增强.t-MEK1/2和t-ERK1/2移植前后表达无显著差异(P＞0.05).结论 处于终末分化阶段的表皮细胞可以向干细胞状态逆转,这个过程可能与ERK MAPK信号通路有关.