摘要:
目的:研究核因子-κB(NF-κB)在刺五加诱导骨髓基质细胞(MSCs)分化为神经元样细胞中的作用.方法:试验分对照组和刺五加诱导组.采用倒置显微镜观察细胞形态;免疫荧光检测MSCs表型、诱导后神经细胞标记蛋白表达和NF-κB亚基p65核移位情况;Western blot法检测诱导组、对照组IκBα的表达.结果:刺五加诱导1 h,可见部分细胞体积缩小,立体感增强,胞体收缩成锥形或球形;诱导5 h,较多细胞成三角形或球形,细胞微丝收缩,伪足形成细长突起,局部交织成网,部分细胞脱落、死亡.诱导7 d,多数细胞成锥形、三角形、球形,交织成网,形成较典型的神经元样细胞.对照组5 h时细胞无明显形态变化,7 d时偶见锥形细胞.免疫荧光检测到诱导组诱导1 h时nestin表达即为强阳性,到第7天仍为阳性,而β-Ⅲ Tubulin在第1小时为弱阳性,3,5 h则为强阳性,并持续到7 d仍为阳性.神经细胞特异性烯醇化酶(NSE)在第3小时为弱阳性,第5,7天则为强阳性,未见胶质细胞标记蛋白GAFP的表达;对照组各标记蛋白表达均为阴性或可疑或弱阳性.对照组出现p65由胞浆向胞核移位,而诱导组p65信号主要仍在胞浆中表达.Western blot发现诱导前IκBα蛋白相对IA为1.0,诱导后刺五加组IκBα蛋白相对IA为0.455 6±0.100 8,较诱导前明显下降(P<0.01).诱导后对照组IκBα蛋白相对IA为0.0296±0.0099,较诱导前及诱导组明显下降(P<0.01).结论:刺五加可诱导MSCs分化为神经元样细胞.在此过程中,刺五加可以抑制NF-κB的活化.