狂犬病毒中和线性表位重组犬腺病毒2型载体的构建

• 作者: 刘晔 张守峰 徐慧娟 徐振波 扈荣良 李忠 王晓虎 王颖 袁子国
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 狂犬病毒 糖蛋白 线性表位 犬腺病毒2型
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3006字
• 语种: 中文

摘要

本试验成功构建了表达狂犬病病毒糖蛋白膜外区3个中和线性表位的重组犬腺病毒2型两个重组质粒.引用相关文献已报道的狂犬病病毒糖蛋白膜外区的3个中和线性表位基因,通过有柔性氨基酸将其3个表位基因相连.将重叠延伸PCR获得3个串联表位基因片段克隆人含犬腺病毒2型YCA18株纤突头部HI环的中间载体pBluescriptⅡKS(+)中,然后用Sal Ⅰ和PacⅠ将中间载体中含3个串联表位的纤突部分回收,克隆至缺失纤突部分的犬腺病毒2型全基因组重组质粒pPloyⅡ-CAV-2及pPloyⅡ-CAV-2-CGS中.经鉴定成功获得在犬腺病毒2型纤突头部HI环处插有狂犬病毒3个串联表位的两个重组质粒,分别命名为pPoly Ⅱ-CAV-2-RG和pPoly Ⅱ-CAV-2-CGS-RG.经软件对犬腺病毒2型纤突蛋白的构象分析表明,在其HI环插入外源抗原表位基因不影响其免疫原性.本试验为进一步研制多抗原表位展示性重组疫苗、新型狂犬病疫苗奠定基础.