RNA干扰技术抑制人肺腺癌A549细胞株EGFR基因表达

• 作者: 苏健 谢至 郭爱林 钟文昭 陈世良 陈志红 黄迎
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: 非小细胞肺癌 RNA干扰 表皮生长因子受体
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 924-926
• 页数: 3页
• 分类号: R73
• 字数: 3686字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2008.06.015

摘要

目的 建立质粒表达载体转录介导的RNAi技术,为开发阻断表皮生长因子受体(epidermal growthfactor receptor,EGFR)信号通路的新途径及其下游信号通路研究奠定基础.方法 化学合成siRNA-EGFR序列,构建并鉴定重组载体pSciencer 2.0 U6-shRNA-EGFR,转染A549人肺腺癌细胞株,免疫印迹和RT-PCR检测沉默效果,用四甲基偶氮唑盐比色法、DAPI染色法、Annexin V/PI双标记法观察基因沉默后细胞生物学特性改变.结果 shRNA-EGFR使EGFR表达明显下调,转染细胞后,显著抑制细胞增殖,诱发凋亡.DAPI染色示细胞核着色增强,胞核缩小,核膜皱缩,染色质凝聚、边缘化、破碎;Annexin V/PI示凋亡早期细胞比例增高;细胞周期分析见shRNA-EGFR各组CO～G1期细胞比例增加,S期比例减少.结论 化学合成法和体内转录质粒载体法介旱的RNAi可序列特异性下调A549细胞株EGFR基因转录和表达,抑制细胞增殖和诱发凋亡,部分逆转NSCLC细胞的恶性表型,有望成为NSCLC基因治疗和功能研究的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭爱林	广东省人民医院医学研究中心生物芯片部	27	105	5.0	9.0
2	黄迎	广东省人民医院医学研究中心生物芯片部	5	10	2.0	3.0
3	苏健	广东省人民医院医学研究中心生物芯片部	14	58	4.0	7.0
4	陈志红	广东省人民医院医学研究中心生物芯片部	25	80	4.0	8.0
5	谢至	广东省人民医院医学研究中心生物芯片部	10	46	4.0	6.0
6	钟文昭	广东省人民医院医学研究中心生物芯片部	17	285	5.0	16.0
7	陈世良	广东省人民医院医学研究中心生物芯片部	3	5	1.0	2.0