RNA干扰抑制肝星状细胞CTGF表达对细胞外基质分泌的影响

• 作者: 主余华 任万华 孙成刚 张春清 石军
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 短发夹RNA 结缔组织生长因子 肝星状细胞 转化生长因子β 细胞外基质
• 年，卷（期）: 2008,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2245-2250
• 页数: 6页
• 分类号: R363
• 字数: 4295字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2008.11.034

摘要

目的:利用pEGFP质粒载体构建介导结缔组织生长因子(CTGF)短发夹BNA表达的质粒,筛选有效的抑制序列后,研究其对IISC-T6中TCF-β1、CTGF及细胞外基质表达的影响.方法:1.分别设计3对针对CTGF的有小发夹结构的两条DNA序列及1对非特异对照序列,构建重组体成功后转染HSC-T6,24 h后通过RT-PCR及Western blotting分析HSC-T6 CTGFmRNA及蛋白表达水平,筛选出有效抑制CTGF表达的序列.2.将已构建并筛选出有最高抑制效率的pEGFP-CTGFshRNA转染HSC-T6,培养24、48 h后用RT-PCR和/或Westernblotting检测各组细胞中TGF-β1、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原基因的表达;放免法分析细胞上清液中Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、透明质酸和层黏连蛋白的含量.结果:将构建成功的3组pECFP-CTGFshRNA转染肝星状细胞后,筛选出两组能高效抑制CTGF表达的序列;pEGFP-CTGFshRNA能明显抑制HSC-T6 CTGF、Ⅰ型、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白的表达,降低上清液中Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、透明质酸和层黏连蛋白的含量(P＜0.01或P＜0.05),而对TGF-β1的基因表达则无影响.结论:pEGFP-CTGFshRNA能高效抑制肝星状细胞中CTGF及细胞外基质的表达;CTG-FshRNA介导的RNA干扰有望对慢性肝病所致肝纤维化具有治疗潜力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张春清	山东大学附属省立医院消化内科	57	324	10.0	14.0
2	主余华	山东大学附属省立医院消化内科	19	136	6.0	11.0
3	任万华	山东大学附属省立医院消化内科	46	311	10.0	15.0
4	石军	山东大学附属省立医院消化内科	15	89	5.0	9.0
5	孙成刚	山东大学附属省立医院消化内科	12	69	4.0	8.0