渗透剂与人工伴侣耦合辅助苹果酸脱氢酶包含体的复性

• 作者: 张拓宇 董晓燕 董海龙
• 来源期刊: 化工学报
• 关键词: 苹果酸脱氢酶(MDH) 复性 渗透剂 人工伴侣 耦合作用
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 生物化学工程与技术
• 页码范围: 988-994
• 页数: 7页
• 分类号: O629.73|O643.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0438-1157.2008.04.030

摘要

苹果酸脱氢酶不仅是一种重要的糖代谢酶,而且具有较高的经济价值和理论研究价值.为了获得苹果酸脱氢酶包含体的有效体外复性方法,本文将渗透剂(蔗糖,甜菜碱,海藻糖)与人工伴侣体系(CTAB/β-CD)耦合,进行了大肠杆菌苹果酸脱氢酶(eMDH)包含体的体外复性研究.结果发现,人工伴侣与蔗糖或甜菜碱耦合,可明显提高eMDH包含体的复性效果,复性后产物的活性较稀释复性提高了2倍以上;但未发现海藻糖与人工伴侣存在这种耦合作用.同时发现,耦合作用还可降低人工伴侣体系中CTAB与β-CD的最佳配比(从1∶8下降到1∶6),从而可提升人工伴侣体系的总用量,实现较高酶浓度条件下的有效复性.另外,利用渗透剂对蛋白质的热保护作用,实现了在较高温度(15℃)下eMDH包含体的复性.对复性产物结构的初步分析发现,耦合作用可使eMDH分子的α-螺旋及二聚体含量明显增多,因此复性产物的活性也显著提高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董晓燕	天津大学化工学院	34	199	9.0	13.0
2	张拓宇	天津大学化工学院	1	1	1.0	1.0
3	董海龙	天津大学化工学院	1	1	1.0	1.0