痕量及微量转基因大米成分半巢式PCR检测方法的建立

• 作者: 张吉红 盛蕾 谭钟 闻伟刚
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 痕量及微量转基因大米 半巢式PCR 检测
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 622-626
• 页数: 5页
• 分类号: TS207.3
• 字数: 4137字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-6630.2008.12.145

摘要

采用半巢式PCR技术建立了食品中痕量及微量转基因大米成分的检测方法.根据大米内源SPS基因以及转基因大米Bt63含有的外源Cry1A(b)/Cry1A(c)融合基因和Btc基因,分别设计了6对普通与半巢式PCR引物.扩增结果显示,针对理论DNA浓度的检测灵敏度,普通PCR扩增灵敏度为1ng/μl左右,半巢式PCR扩增灵敏度达到10-3～10-4ng/μl,半巢式PCR比普通PCR方法提高了103～104倍;在质量百分比的检测灵敏度方面,普通PCR方法扩增灵敏度在0.1%～1%之间,半巢式PCR方法的检测灵敏度能够达到0.001%～0.01%,半巢式PCR比普通PCR方法要提高10倍以上.在实际样品的检测中,速冻汤圆、婴儿米粉及芝士小圆饼等食品经普通PCR扩增,其内源SPS基因条带模糊或未扩增到,进一步采用半巢式PCR扩增后,能够得到清晰明亮的特异性条带.所有样品均未扩增到外源Cry1A(b)/Cry1A(c)和Btc基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	闻伟刚		36	406	11.0	18.0
2	张吉红		33	167	8.0	11.0
3	谭钟		9	77	6.0	8.0
4	盛蕾		4	64	4.0	4.0