编码草菇中性内切葡聚糖酶Ⅰ的基因克隆与表达研究

• 作者: 周晨妍 孙军亭 李剑芳 王瑾 王超凯 邬敏辰
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 学科: 工学
• 关键词: 中性内切葡聚糖酶Ⅰ 草菇毕赤酵母 分泌表达
• 年，卷（期）: 2008,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 7-11,16
• 页数: 6页
• 分类号: TS2
• 字数: 3988字
• 语种: 中文

摘要

采用RT-PCR法,以草菇Volvariella.volvacea V23总RNA为模板,克隆了包括自身信号肽在内的中性内切葡聚糖酶Ⅰ基因(eg Ⅰ)的cDNA序列.测序结果表明,它全长1167 bp,编码389个氨基酸,推测第1～23位氨基酸为信号肽,第24～389位氨基酸为成熟肽,属于糖苷水解酶第5家族.PCR扩增成熟肽编码基因并将其插入到分泌型表达载体pPIC9K中,重组载体经Sal Ⅰ线性化后电转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,筛选得到了1株高产中性内切葡聚糖酶Ⅰ的工程菌株P.pastoris-EG1.SDS-PAGE检测表明,重组中性内切葡聚糖酶Ⅰ分子质量约为42 ku.在甲醇诱导96 h时,酶活达到3 698 U/mL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邬敏辰	江南大学医药学院	163	1504	22.0	29.0
2	周晨妍	江南大学生物工程学院	12	146	7.0	12.0
3	王瑾	江南大学生物工程学院	10	87	6.0	9.0
4	李剑芳	江南大学食品学院	52	513	12.0	21.0
5	王超凯	江南大学食品学院	1	4	1.0	1.0
6	孙军亭	江南大学生物工程学院	2	10	2.0	2.0