丙型肝炎病毒核心蛋白基因真核表达质粒的构建和表达

• 作者: 卢娟 张景霞 张磊 李端 肖丹 苏海霞 门可 闫永平
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 丙型肝炎病毒 核心蛋白 真核表达
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 233-235
• 页数: 3页
• 分类号: R512.63
• 字数: 2610字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-6273.2008.02.009

摘要

目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白真核表达质粒,并在HepG2细胞中稳定表达.方法:采用RT-RCR方法从丙型肝炎患者血清中得到HCVC区的cDNA序列,然后克隆入pcDNA3.0载体,构建真核表达质粒pcDNA-HCV,并进行酶切鉴定和测序鉴定;采用脂质体转染技术将pcDNA-HCV稳定转染于HepG2细胞系,并用G-418进行筛选;采用Western Blotting方法和免疫细胞化学方法检测HepG2细胞中HCV核心蛋白表达情况.结果:从HCV感染者血清中扩增得到的503bpHCV cDNA序列.属于HCV 1型基因C区,并成功构建了真核表达质粒pcDNA-HCV.经Western blotting和免疫细胞化学检测,稳定转染的HepG2细胞中有HCV核心蛋白的表达.结论:成功构建HCV核心蛋白真核表达质粒pcDNA-HCV,并可以在真核细胞HepG2中稳定表达.