RT-PCR方法检测贝类中诺沃克样病毒的研究

• 作者: 吴风亮 张颖
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 诺沃克样病毒 反转录PCR 贝类 检测
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 347-351
• 页数: 5页
• 分类号: TS254.7
• 字数: 5576字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-6630.2008.05.074

摘要

目的:本研究从病毒富集和核酸提取两方面进行探索,旨在建立一个反转录(RT)PCR技术检测贝类中诺沃克样病毒(NLVs)的方法.方法:利用脊髓灰质炎病毒作为参照毒株,优化了甘氨酸缓冲液-聚乙二醇(PEG)病毒浓缩方法;同时比较了异硫氰酸胍法、SDS-蛋白酶K法、Trizol-异丙醇法、试剂盒法四种RNA提取方法;对市售贝类样品进行了检测,并利用基因测序对阳性样品进行验证.结果:本研究采用的pH9.5甘氨酸缓冲液 -16%聚乙二醇病毒浓缩法,病毒的回收率为16.8%,利用Trizol-异丙醇法提取RNA,检出限为8.1×10 2 RT-PCR50/5g贝肉,实际检测贝类样品25件,其中3件样品为阳性,基因测序结果亦证实为阳性.结论:本研究建立了一个灵敏度较高、较为有效的RT-PCR技术检测贝类中诺沃克样病毒的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张颖	中国环境管理干部学院生态学系	44	405	12.0	18.0
2	吴风亮	河北农业大学农村发展学院	13	99	5.0	9.0