人HIF-1α miRNA干扰质粒的构建及其在Lovo细胞中有效性的检测

• 作者: 丁震宇 梁后杰
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 缺氧诱导因子-1α 微小RNA RNA干扰 结肠癌 Lovo细胞
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1028-1031
• 页数: 4页
• 分类号: R735.35
• 字数: 3917字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-6273.2008.06.008

摘要

目的:构建人HIF-1α的miRNA特异性干扰表达载体并转染人结肠癌Lovo细胞检测其有效性.方法:设计合成针对人HIF-1α基因的特异性miRNA前体寡核苷酸,依次通过退火、连接,构建含HIF-1α前体miRNA的重组干扰质粒pcDNA?6.2-GW/EmGFP-HIF-1α-miR,并转染人结肠癌Lovo细胞,经半定量RT-PCR技术鉴定其干扰有效性.结果:经双酶切及测序鉴定,针对人HIF-1α基因的两组miRNA干扰质粒构建成功,并能够有效抑制人结肠癌Lovo细胞中HIF-1α mRNA表达.结论:成功构建针时人HIF-1α基因的miRNA特异性有效干扰质粒,为后续HIF-1α基因慢病毒miRNA表达载体的构建及其在结肠癌多药耐药中的相关功能研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁后杰	第三军医大学西南医院肿瘤科	197	911	14.0	18.0
2	丁震宇	第三军医大学西南医院肿瘤科	5	13	3.0	3.0