bulge区毛囊组织块培养结合酶消化法分离大鼠毛囊隆突部细胞的生物学特征

• 作者: 佟浩 柏树令 王慧君 田伟
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 毛囊 隆突部 细胞 生物学特性 纯度
• 年，卷（期）: 2008,（20）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 3806-3809
• 页数: 4页
• 分类号: R329.449
• 字数: 4172字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.20.002

摘要

背景:目前毛囊隆突部细胞的分离培养方法多存在细胞分离纯度不高、活力差等缺点,采用组织块法和酶消化法分离培养大鼠毛囊隆突部细胞能否克服上述缺点?目的:本实验采用组织块法和酶消化法分离培养大鼠毛囊隆突部细胞并对其进行鉴定.设计、时间及单位:单一样本设计,体外细胞培养实验.于2007-03/08在中国医科大学组织工程学实验室完成.材料:选用15只雌性Wistar大鼠,由中国医科大学实验动物中心提供.实验用表皮生长因子、Hoechst33342购自美国Sigma公司,SABC-小鼠IgG抗体免疫组化试剂盒、SABC-Cy3免疫荧光组织化学试剂盒、DAB显色刑、SABC-FITC免疫荧光组化试剂盒均购自武汉博士德公司.方法:利用显微分离的方法将大鼠触须部皮肤分离,剪开真皮和皮下组织,将毛囊与周围组织钝性分离取出毛囊,剪开结缔组织鞘,用显微外科镊取出毛囊外根鞘bulge区,移入培养板中进行组织块培养,应用0.25%胰酶+0.02%EDTA消化分离大鼠毛囊bulge区细胞,倒置相差显微镜下观察其增殖能力,免疫荧光法检测毛囊隆突部细胞K15、β1整合素和P63的表达情况.主要观察指标:①大鼠隆突部细胞增殖能力.②毛囊隆突部细胞K15、β1整合素和P63的表达.结果:①大鼠隆突部细胞胞体积较大,胞核大,核仁明显,细胞生长迅速,活力好,3-4d即可传代,具有增殖能力强、细胞纯度高等特性.②细胞免疫荧光结果显示培养的细胞胞浆角蛋白15阳性,细胞的胞膜β1整合素阳性,细胞的胞核P63阳性.结论:组织块法结合酶消化法可成功分离培养毛囊降突部细胞,细胞可同时表达K15、β1整合素和P63,纯度高,活力好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	柏树令	中国医科大学基础医学院组织工程学教研室	137	795	14.0	20.0
2	佟浩	中国医科大学基础医学院组织工程学教研室	57	292	10.0	14.0
3	田伟	中国医科大学基础医学院组织工程学教研室	17	70	5.0	8.0
4	王慧君	中国医科大学基础医学院组织工程学教研室	3	6	2.0	2.0