藻酸钠微球介导髓核细胞对骨髓间充质干细胞诱导分化的影响

• 作者: 周方宇 周松 方忠 李锋 牛朋彦 陈文坚
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 髓核细胞 藻酸钠微球 非接触共培养
• 年，卷（期）: 2008,（49）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 9678-9682
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 5649字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.49.027

摘要

背景:椎间盘退行性变的理想治疗方法是利用组织工程技术修复退行性变的椎间盘,而修复所需的髓核细胞来源十分有限.目的:观察在藻酸盐微球的介导下,髓核细胞与骨髓间充质十细胞非接触共培养时,髓核细胞对骨髓间充质干细胞的诱导作用.设计、时间及地点:细胞学体外观察,实验于2007-10/2008-08在华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科实验室和中心实验室进行.材料:4月龄健康新两兰大耳白兔5只,取髓核细胞与骨髓间充质干细胞原代培养,利用传代法分离纯化.方法:①将纯化的骨髓间充质干细胞经胰蛋白酶消化、收集,并与适量的藻酸钠溶液混合,形成109 L-1的单细胞悬液,将混合好的单细胞悬液经注射器滴加至35 g/L的CaCl2溶液中,形成海藻酸钙凝胶珠.②将海藻酸钠凝胶微球与髓核细胞共培养.在7 d和15 d时,分组溶解海藻酸钙凝胶珠.收集骨髓间充质干细胞.主要观察指标:利用免疫组化技术、RT-PCR技术和Western blot技术检测骨髓间充质干细胞中Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达,用以判断髓核细胞对骨髓间充质干细胞在非接触条件下的诱导作用.结果:在骨髓间充质干细胞的细胞爬片免疫组化染色中可见,Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖染色阳性,RT-PCR和Western blot 结果显示经诱导后骨髓间充质干细胞中已有Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖基因的表达,且诱导15 d组的目的条带明显亮于诱导7 d组的目的条带.结论:在藻酸盐微球的介导下,体外非接触共同培养时髓核细胞能够实现对骨髓间充质干细胞的诱导作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方忠	华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科	72	368	10.0	13.0
2	李锋	华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科	251	1843	20.0	30.0
3	周方宇	华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科	8	60	4.0	7.0
4	周松	华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科	22	178	7.0	12.0
5	牛朋彦	华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科	9	36	4.0	6.0
6	陈文坚	华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科	22	103	6.0	8.0