含产气荚膜梭菌肠毒素基因重组质粒pET-28a-CPE的构建和表达

• 作者: 吴刚 孙中义 张克勤 李彦锋 李黔生 毕罡 靳风烁
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 产气荚膜梭菌肠毒素 表达 pET-28a 前列腺癌
• 年，卷（期）: 2008,（21）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2430-2432,2436
• 页数: 4页
• 分类号: R378.82|R737.25
• 字数: 4542字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2008.21.024

摘要

目的 构建含全长产气荚膜梭菌肠毒素(CPE)基因的重组表达质粒pET-28a-CPE并进行原核表达.方法 培养并提取表达肠毒素的产气荚膜梭菌标准菌株64615的基因组DNA,PCR扩增出全长CPE基因片段并连接入pET-28a载体质粒中,构建重组原核表达质粒pET-28a-CPE,进行酶切及测序鉴定,并转化入感受态大肠杆菌(E.coli)BL21中,用IPTG诱导CPE表达.结果 复苏、培养成功产肠毒素的产气荚膜梭菌标准菌株64615,成功构建了表达质粒pET-28a-CPE,经酶切及测序鉴定结果 与设计的完全相符,成功用E.coil BL21进行了原核表达,目的 蛋白CPE占总表达蛋白45.37%.结论 本实验成功构建并表达了含CPE的重组质粒pET-28a-CPE,为进一步观察CPE时前列腺肿瘤等的生物学作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李黔生	第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科	87	413	10.0	15.0
2	靳风烁	第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科	250	1228	15.0	23.0
3	张克勤	第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科	82	317	9.0	13.0
4	吴刚	第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科	61	289	11.0	13.0
5	李彦锋	第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科	85	438	11.0	16.0
6	毕罡	第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科	10	47	4.0	6.0