Par-4基因沉默对人骨髓间充质干细胞中Smac基因表达和半胱氨酸蛋白水解酶3酶活性的影响及其抗凋亡作用

• 作者: 吴升华 周国平 管亚飞 袁传顺 郭锡熔 陆超 陈吉庆 陈荣华 黄松明
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA 干细胞 脱噬作用 基因,Par-4
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 411-415
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3790字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0376-2491.2008.06.014

摘要

目的 研究Par-4基因沉默对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)中Smac基因表达和半胱氨酸蛋白水解酶(Caspase)3酶活性的影响及其抗凋亡作用.方法 原代培养hBMSC.谷氨酸诱导hBMSC凋亡.设计和合成两对针对Par-4基因mRNA的小RNA干扰(siRNA)序列(Par-4-SiRNA-1、2),构建真核细胞表达载体,用脂质体介导转染hBMSC,利用G418筛选稳定表达细胞株.实时荧光定量PCR法检测Par-4 mRNA表达水平.流式细胞术测定细胞凋亡百分率.Western印迹测定Smac蛋白表达量.比色法测定Caspase-3酶的活性.结果 设计的Par-4-SiRNA-1、2可显著诱导hBMSC中Par-4基因沉默,Par-4 mRNA水平分别被降低88%、67%,谷氨酸诱导hBMSC凋亡,凋亡百分率为(58.9±8.9)%.Par-4-SiRNA-1可显著拮抗谷氨酸的诱导凋亡作用,凋亡百分率降为(37.2±6.3)%(F=58.26,P＜0.01).Par-4-SiRNA-1对谷氨酸诱导的hBMSC中Smac蛋白表达上调(P＜0.01)和Caspase-3酶活性上调(P＜0.01)有显著的抑制作用(P＜0.01).结论 Par-4基因沉默能拮抗谷氰酸对hBMSC凋亡的诱导作用.其机制可能与Smac基因表达和Caspase-3酶活性被抑制有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴升华	南京医科大学第一附属医院儿科	83	667	9.0	23.0
2	陈荣华	南京医科大学儿科研究所	241	2081	20.0	32.0
3	黄松明	南京医科大学儿科研究所	115	804	15.0	22.0
4	陈吉庆	南京医科大学第一附属医院儿科	70	331	10.0	13.0
5	郭锡熔	南京医科大学儿科研究所	220	1261	16.0	21.0
6	周国平	南京医科大学第一附属医院儿科	59	173	7.0	9.0
7	陆超	南京医科大学第一附属医院儿科	69	226	7.0	9.0
8	管亚飞	南京医科大学第一附属医院儿科	12	19	3.0	3.0
9	袁传顺	南京医科大学第一附属医院儿科	3	7	2.0	2.0