转基因骨髓基质细胞修复骨缺损

• 作者: 付春江 张军 杨成林 毕郑钢 邵国军
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 骨形念发生蛋白质类 转染 组织构建
• 年，卷（期）: 2008,（34）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 6692-6696
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 6373字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.34.030

摘要

背景:转基因细胞移植可以提高成骨细胞数量及成骨活性,有可能成为骨缺损的重要修复方法.目的:构建入骨形态发生蛋白2真核表达载体,鉴定并转染兔骨髓基质细胞,应用基因治疗的方法修复兔桡骨缺损,观察其成骨效果.设计、时间及地点:单一样本观察及同体对照动物实验,于2004-06/2006-02在哈尔滨医科大学附属第一医院中心实验室完成.材料:克隆质粒psp-65BMP2为解放军第四军医大学口腔医院惠赠;pcDNA3.1表达载体购自Invitrogen公司:清洁级新西兰白兔32只,雌雄不限,体质量为2～2.5 kg.方法:双酶切克降载体将骨形态发生蛋白2目的基因与真核表达载体pcDNA3.1连接.将自体骨髓基质细胞修复兔桡骨缺损.分别于16只新西兰白兔缺损处植入载有转基因细胞的胶原,对侧植入单纯胶原对照.16只新西兰白兔缺损处植入载有自体细胞的胶原,对侧植入单纯胶原对照.主要观察指标:①免疫组织化学及Western blotting检测转染骨形态发生蛋白2基因骨髓基质细胞的表达效果.②术后12刷麻醉后处死动物,行缺损处大体观察、X射线观察及组织学和电镜观察.结果:①成功构建骨形态发生蛋白2真核表达载体,转染骨髓基质细胞后,免疫组织化学染色,可在骨髓基质细胞胞浆显示棕色阳性染色:Western blotting榆测有针对骨形态发生蛋白2抗体的蛋白条带,证实骨形态发生蛋白2表达.②组织学和电镜观察实验侧骨缺损处可见大量成骨细胞及新生基质.对照侧仅在断端间见少量骨细胞,断端处为纤维组织充填:转基因骨髓基质细胞修复骨缺损完全愈合;大体及X射线观察转染实验侧有连续骨痂通过骨缺损处,对照侧无连续骨痂通过断端.结论:骨髓基质细胞经基因转染后可以表达骨形态发生蛋白2,并可以修复骨缺损.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张军	哈尔滨医科大学附属第一医院骨科	58	144	7.0	9.0
2	毕郑钢	哈尔滨医科大学附属第一医院骨科	82	320	9.0	13.0
3	付春江	哈尔滨医科大学附属第一医院骨科	31	67	5.0	6.0
4	杨成林	哈尔滨医科大学附属第一医院骨科	50	245	9.0	12.0
5	邵国军	哈尔滨医科大学附属第一医院骨科	4	13	2.0	3.0