人KiSS-1基因克隆及其慢病毒载体的构建

• 作者: 于波 张俐
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 基因 克隆 分子 病毒载体
• 年，卷（期）: 2008,（42）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 8230-8234
• 页数: 5页
• 分类号: R394
• 字数: 5734字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.42.018

摘要

背景:慢性病毒载体技术是目前转基因中最有效和最成功的方法,技术操作简便.目的:克隆转移抑制基因KiSS-1基因不含信号肽的表达序列,构建人KiSS-1基因的慢病毒表达载体.设计、时间及地点:开放性实验于2006-09/2007-12在福建师范大学发育学院实验室完成.材料:载体pNL-IRES2-EGFP由福建师范大学发育学院实验室保存.方法:从人正常胎盘组织中提取总RNA,经反转录一聚合酶链反应得到KiSS-1基因开放阅读框cDNA序列,并将其克隆到慢病毒载体pNL-IRES2-EGFP中,构建其表达质粒pNL-IRES2-EGFP-KiSS-1.主要观察指标:KISS-1目的基因片段的克隆,重组表达质粒pNL-IRES2-EGFP-KiSS-1的酶切鉴定及测序.结果:经酶切鉴定和基因序列测定,证实重组入载体pNL-IRES2-EGFP的片段为目的基因开放阅读框的核苷酸序列.结论:成功构建了重组质粒pNL-IRES2-EGFP-KiSS-1.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张俐	福建中医学院骨伤系	133	708	15.0	22.0
2	于波	福建中医学院骨伤系	2	17	1.0	2.0