大鼠Smad1基因重组腺病毒的构建

• 作者: Yuewen Gong 曾珊 朱虹 申竤 申良方 钟美佐
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Cre-loxP 基因重组 Srnad1 腺病毒
• 年，卷（期）: 2008,（18）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2597-2600
• 页数: 4页
• 分类号: R.392
• 字数: 2734字
• 语种: 中文

摘要

目的 利用Cre-loxP特异性位点基因重组技术构建大鼠Smadl的重组腺病毒.方法 巢式PCR得到大鼠Smadl全部开放阅读框架序列,克隆到质粒pCR-Blunt II-TOPO中,然后将目的 基因片段连接到中间载体质粒pDNR-CMV,测序后在Cre重组酶作用下,将Smad1 cDNA转移到腺病毒载体pLP-Adeno-X-CMV.在HEK 293细胞中包装和扩增重组腺病毒,并检测Smad1基因重组腺病毒在大鼠肝脏星状细胞系HSC-T6中的表达和功能.结果 PCR法和限制性内切酶Xhoi I消化法均证实Smad1重组腺病毒的成功构建,RT-PCR和Western Blot检测证实该重组腺病毒显著性增强了HSC-T6细胞中Smad1的mRNA、蛋白表达及其磷酸化水平.结论 Cre-loxP特异性住点基因重组技术是一种快速、高效构建基因重组腺病毒的方法 ,大鼠Smad1基因重组腺病毒的成功构建为与Smad1有关的细胞信号调控以及基因治疗提供了良好的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	申良方	中南大学湘雅医院肿瘤科	78	412	9.0	15.0
2	钟美佐	中南大学湘雅医院肿瘤科	76	411	11.0	15.0
3	曾珊	中南大学湘雅医院肿瘤科	21	98	6.0	8.0
4	朱虹	中南大学湘雅医院肿瘤科	20	206	10.0	13.0
5	申竤	中南大学湘雅医院医学实验研究中心	1	1	1.0	1.0