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摘要:
目的:Bmi-1是一种属于PeG家族的原癌基因,它直接参与细胞生长、增殖的调节,是成体干细胞和白血病干细胞自我更新所必需的.检测原癌基因bmi-1在不同来源CD34+细胞中的表达,探讨其与细胞增殖的关系.方法:实验于2007-03/11在广州医学院生化教研室完成.①实验材料:白血病细胞株SHI-1由苏州大学附属第一医院、江苏省血液病研究所薛永权教授惠赠;脐血由广州医学院附属广州市第一人民医院妇产科提供,实验经产妇知情同意,并经医院伦理委员会批准;外周血采自健康成年自愿捐献者.②实验方法:以CD34免疫磁珠标记急性单核细胞白血病细胞株SHI-1,上柱分选CD34+细胞,脐血单个核细胞以同样的方法标记CD34免疫磁珠标记和分选CD34+细胞,应用流式细胞仪分析分选后CD34+的富集度;将分选前后的CD34+、CD34-SHI-1细胞以相同的密度接种于24孔板,分不同的时间点计数细胞,并绘制生长曲线.选用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞.以正常脐带血和外周单个核细胞为对照,采用半定量RT-PCR法检测bmi-1基因在不同来源CD34+细胞中的表达.结果:①SHI-1细胞分选前后标记CD34-PE、CD38-FITC流式分析显示,分选后CD34+细胞的富集度为99%以上.②SHI-1-CD34+细胞呈缓慢生长趋势,不同于分选前细胞的指数生长状态.③RT-PCR检测显示,bmi-1 mRNA在SHI-1-CD34+细胞中的表达高于其在脐血-CD34+与外周血单个核细胞中的表达(P<0.05).bmi-lmRNA在SHI-1、SHI-1-CD34+、SHI-1-CD34-细胞中表达差异不显著,在脐血-CD34-细胞中弱表达或不表达.结论:bmi-1基因在SHI细胞株CD34+与CD34-细胞中均高表达,说明其与血液细胞的高增殖能力密切相关.
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文献信息
篇名 bmi-1原癌基因在不同来源CD34+细胞的表达
来源期刊 中国组织工程研究与临床康复 学科 医学
关键词 bmi-1基因 CD34+细胞 免疫磁珠 流式细胞仪 干细胞
年,卷(期) 2008,(25) 所属期刊栏目 技术与方法
研究方向 页码范围 4891-4894
页数 4页 分类号 R394.2
字数 5383字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.25.032
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 张雅容 广州医学院生化教研室 1 4 1.0 1.0
2 魏亚明 广州市第一人民医中心实验室 15 111 5.0 10.0
3 许艳丽 广州市第一人民医中心实验室 39 315 9.0 17.0
4 林秀梅 广州市第一人民医中心实验室 4 8 2.0 2.0
5 汪云霞 广州医学院生化教研室 4 9 2.0 3.0
6 王晓华 广州医学院生化教研室 24 130 7.0 10.0
传播情况
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旬刊
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21-1581/R
大16开
沈阳浑南新区10002信箱
8-584
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