脐血间充质干细胞分离扩增及向成骨与脂肪细胞的分化

• 作者: 唐柳平 田新 符仁义 肖萍 袁天柱 陈宏
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 新牛儿 脐血间充质干细胞 诱导分化
• 年，卷（期）: 2008,（43）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 8593-8596
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 1018字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.43.033

摘要

背景:和骨髓间充质干细胞相比,脐血间充质干细胞取材方便,其免疫原性较低,能耐受更大程度卜的HLA配型不符,分离出的间充质干细胞纯度更高.目的:分析新生儿脐血间充质干细胞体外分离、纯化、扩增,以及向成骨及脂肪细胞定向诱导分化的方法与条件.设计、时间及地点:观察性实验,于2004-09/2005-11在四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室,干细胞与组织工程研究室完成.材料:胎龄37～40周的新生儿脐血.方法:以Ficoll-HyPaque淋巴细胞分离液密度梯度法、沉降红细胞后密度梯度法及CD34+免疫磁珠负选法分离脐血单个核细胞.将分离获得的单个核细胞采用L-DMEM培养基+体积分数0.1胎牛血清或Mesencult TM 培养基+体积分数0.1胎牛血清进行间充质干细胞培养传代,获得的第3代集落牛长细胞进行流式细胞仪表面抗原测定,并诱导其向成骨、脂肪细胞分化.主要观察指标:①脐血间充质干细胞的鉴定.②经茜素红染色及油红染色证实其诱导分化.结果:经沉降红细胞后密度梯度离心分离的单个核细胞,使用Mesencult TM培养基+体积分数0.1胎牛血清培养成功率高,第3代可出现明显的集落生长,而另两种方法分离培养的细胞则难以形成集落;集落细胞表面抗原测定表达CD29,CD59,D71,不表达CD34,CD45及HLA-DR等分子.成骨定向诱导分化的集落细胞经茜素红染色胞浆中出现有大量的钙沉积,成脂肪定向诱导分化的集落细胞油红染色示胞浆充满油滴空熔泡.结论:使片j MesencultTM培养基+体积分数0.1胎牛血清培养由甲基纤维素沉降脐血红细胞后密度梯度离心分离的单个核细胞培养成功率高,第3代可出现明显的集落生长.经诱导后可分化为成骨细胞和脂肪细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田新	广西医科大学附属第四医院儿科	10	24	3.0	3.0
2	唐柳平	广西医科大学附属第四医院儿科	29	102	6.0	8.0
3	肖萍	广西医科大学附属第四医院儿科	31	93	6.0	8.0
4	符仁义	广西医科大学附属第四医院儿科	2	7	2.0	2.0
5	袁天柱	广西医科大学附属第四医院儿科	32	148	6.0	10.0
6	陈宏	广西医科大学附属第四医院儿科	14	18	3.0	4.0