真核表达载体血管内皮生长因子转染血管内皮细胞及对新生血管形成的影响

• 作者: 刘永锋 张佳林 李铁民 程颖 赵宁
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 血管内皮生长因子 转染 血管形成
• 年，卷（期）: 2008,（18）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 3571-3574
• 页数: 4页
• 分类号: R617
• 字数: 3914字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.18.029

摘要

背景:血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)能与存在内皮细胞表面的特异性受体结合,刺激体内新生血管形成,但在体内半衰期极短,在移植局部难以维持足够的浓度,限制了其临床应用.目的:观察VEGF与增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent,EGFP)共表达载体转染对大鼠血管内皮细胞形成新生血管的影响.设计、时间及地点:随机分组设计、对照动物实验,于2004-09/2005-01在中国医科大学附属第一医院器官移植实验室完成.材料:30只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为3组,每组10只.质粒pIRES2-EGFP/VEGF165由第四军医大学提供.方法:采用层析法大量提取pIRES2-EGFPNEGF165质粒,采用阳性脂质体法进行转染,计数1×106血管内皮细胞植入雄性Wiser大鼠肾被膜下.实验组:植入转染质粒pIRES2-EGFP/VEGF165的内皮细胞:空白转染组:植入转染质粒pIRES2-EGFP的内皮细胞:对照组:植入正常大鼠血管内皮细胞.主要观察指标:①转染72 h后观察EGFP及VEGF表达情况.②流式细胞仪检测转染效率.③植入后14 d苏木精-伊红染色观察植入血管内皮细胞处组织形态学变化.结果:30只大鼠均进入结果分析.①荧光显微镜下实验组内皮细胞有特异性的EGFP表达.②流式细胞仪分析转染效率为13.06%.③实验组血管内皮细胞胞核和胞浆中均有VEGF表达.反转录-聚合酶链反应显示实验组大鼠血管内皮细胞中有人源化VEGF165基因在mRNA水平表达.④移植后14 d.实验组大鼠肾被膜下可见成团的新生毛细血管网形成,而对照组及空白转染组虽血管内皮细胞仍存活,但未形成明显血窦.结论:转染VEGF基因是促进内皮细胞早期(14d内)形成新生血管的有效途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘永锋	中国医科大学附属第一医院器官移植科	194	1003	14.0	22.0
2	张佳林	中国医科大学附属第一医院器官移植科	60	155	6.0	9.0
3	李铁民	中国医科大学附属第一医院器官移植科	17	61	5.0	6.0
4	程颖	中国医科大学附属第一医院器官移植科	82	365	8.0	16.0
5	赵宁	中国医科大学附属第一医院器官移植科	86	346	9.0	13.0