人羊膜间充质干细胞联合神经生长因子及纤维蛋白胶移植治疗大鼠脑损伤

• 作者: 关方霞 宋来君 李远 杜英 杨波 焦红亮 王辉 胡样 胡炜 齐义军
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 羊膜间充质干细胞 移植 神经生长因子 纤维蛋白胶
• 年，卷（期）: 2008,（51）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 10005-10009
• 页数: 5页
• 分类号: R394.2
• 字数: 7155字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.51.001

摘要

背景:以往对间充质干细胞分化的报道多为体外培养,甚少涉及宿主体内间充质干细胞的分化及辅助因子对其分化的影响.目的:探讨人羊膜问充质干细胞移植对脑损伤大鼠行为学和空间学习记忆能力的影响,以及神经生长因子、纤维蛋白胶在人羊膜问充质干细胞移植中的作用.设计、时间及地点:细胞学体内对照观察,于2006-07/2007-01在郑州大学医学院完成.材料:正常足月剖腹产胎儿的胎盘由郑州大学第一附属医院妇产科提供.Wistar大鼠90只,随机分为5组:假手术组、模型对照组、细胞移植组、细胞+神经生长因子组、细胞+纤维蛋白胶组,18只/组.方法:无菌条件下钝性分离胎盘脐带血的羊膜,经胰酶消化制成单细胞悬液,贴壁法纯化扩增,传至第3代的人羊膜间充质干细胞备用.假手术组只开颅钻孔不进行硬膜外撞击,其余4组大鼠均采用自由落体硬膜外搏击法建立脑损伤模型.造模1 d后,模型对照组在损伤区分点注射生理盐水40 pL;细胞移植组注射含1×107个人羊膜间充质干细胞的等量生理盐水;细胞+神经生长因子组在细胞移植组基础上于造模后连续2周每日腹腔沣射0.5 μ g神经生长因子;细胞+纤维蛋白胶组注射人羊膜间充质干细胞与纤维蛋白胶混合液40μL:假手术组不行细胞移植.主要观察指标:行为学评分,Morris水迷宫检测潜伏期,脑组织切片免疫组化染色检测神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白的表达.结果:移植后7 d,与模型对照组比较,细胞移植组、细胞+神经生长因子组、细胞+纤维蛋白胶组行为学评分均明显升高,但细胞移植组升高幅度明显低于后2组(F=155.322,P<0.05).移植后3周,与模型对照组比较,细胞移植组、细胞+神经生长因了组、细胞+纤维蛋白胶组满伏期均明显缩短,但细胞移植组缩短幅度明显小于后2组(F=22.678,P<0.05).移植后4周,人羊膜间充质工细胞能够在大鼠损伤脑组织内分化,与神经生长因子、纤维蛋白胶混合移植可提高神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白的阳性表达率(F=705.406,F=424.884,P<0.05).结论:人羊膜间充质干细胞可改善脑损伤大鼠行为能力及空间学习记忆能力,分化后能表达神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸件蚩白,神经生长因子与纤维蛋白胶均可增强细胞移植治疗效果.