体外诱导大鼠骨髓干细胞向肝干细胞分化的特征

• 作者: 李俊峰 程军 马勇 魏伟
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓细胞 干细胞 分化 肝干细胞 大鼠
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1493-1496
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 4529字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.08.031

摘要

目的:骨髓干细胞分化为肝干细胞的发现具有重要的临床应用价值,可用其作为生物人工肝或肝细胞移植的供体细胞,以解决供体缺乏,同时自体细胞还可免除异基因或异种细胞所致的许多问题.为此,实验模拟肝脏发育的微环境,观察体外诱导分化大鼠骨髓干细胞为肝干细胞的可行性及特征.方法:实验于2006-10/2007-08在解放军第一二三医院南京军区肝病中心实验室完成.①实验动物: SPF级SD大鼠,2月龄,体质量(200±20) g,雌雄不拘,购于上海斯莱克实验动物公司.实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准.②实验方法:采用密度梯度分离法分离培养大鼠骨髓干细胞,并设诱导组和非诱导组,应用25 μg/L肝细胞生长因子、10 μg/L成纤维生长因子-4、10 μg/L干细胞生长因子共同诱导.③实验评估:于诱导第0,7,14,21,28天,观察细胞形态变化,采用放射免疫法检测培养上清液中甲胎蛋白浓度,免疫组织化学染色检测甲胎蛋白、细胞角蛋白19、白蛋白的表达,应用流式细胞仪检测甲胎蛋白、细胞角蛋白19表达阳性细胞比例.结果:①诱导培养的骨髓干细胞呈卵圆形或圆形的肝干细胞样改变.②放射免疫法检测到诱导组细胞甲胎蛋白浓度逐渐升高,第14天达高峰,随后呈下降趋势,与非诱导组相比,除第0,7天无差异,其余各时间点差异均显著(P < 0.05).③免疫细胞化学法检测到诱导组细胞特异性表达甲胎蛋白、细胞角蛋白19及白蛋白,非诱导组不表达3种蛋白.④流式细胞分析诱导组甲胎蛋白阳性细胞比例为66.20%、细胞角蛋白19阳性细胞的比例为44.96%.结论:在实验建立的诱导培养体系中,骨髓干细胞在体外能分化为肝干细胞样细胞,诱导细胞有分泌甲胎蛋白、细胞角蛋白19、白蛋白的特征性功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马勇		124	431	10.0	16.0
3	魏伟		15	170	6.0	13.0
4	程军	安徽医科大学临床药理研究所	3	4	1.0	2.0
5	李俊峰		1	1	1.0	1.0